目前，国内外进入临床试验的细胞疗法和基因疗法数量显著增长，迫切地需要为这些“活性药物”的商业化做好准备。今天我们将探讨细胞治疗行业的研发到商业化过程，如何选择“靠谱”细胞原材料？
诺华1、阿斯利康2、辉瑞3等全球知名的药物研发公司发表的研究表明都曾在细胞免疫疗法研究中使用Charles River Cell Solutions细胞产品。这么多知名药企纷纷选择与Charles River Cell Solutions进行合作的原因是什么？
2017年8月30日，FDA批准诺华CAR-T细胞疗法Kymriah 正式上市引发轰动。曾参与并主导此款药物从宾夕法尼亚大学到制药巨头诺华技术合作的Dr. Knut Niss博士表示，诺华此项研发中使用Charles River Cell Solutions的产品和服务进行细胞治疗开发。事实上，此后上市的多款细胞治疗药物都曾使用Charles River Cell Solutions细胞原材料进行研究开发。
通过单采技术直接获得的Leukopaks可以直接获得高含量细胞材料，减少其他细胞类型的干扰，保证产品的持续稳定性。无论是从细胞质量还是成本角度，Leukopaks都是目前细胞治疗行业的首选。现在的问题是，Leukopaks该以何种方式送达研究者手中——新鲜or冻存？
如果确定选择Leukopaks作为初始材料时，新鲜的Leukopaks总是我们的第一反应。但是综合考虑各方因素，这还会是研发者的最优选择吗？可能未必。
因为使用“新鲜”产品是有严苛门槛的。
对研究者：需要准确预估未来一段时间实验进度，计划好时间向供应商提需求；
对供应商：需要高效的项目管理，按照客户的要求在规定的时间，联系指定的捐赠者，捐赠符合要求的细胞材料；
对实验：需要按照研究人员的计划按部就班，避免出现意外；
送达时限：实际使用人要和供应商有不超过24小时的运输距离。
“在欧洲，对于细胞原材料捐赠监管严格，因此需要从美国运出。在获取细胞治疗起始材料方面，欧洲的研究公司被落在了后面，而实际上，可能只需要对运输流程进行一些修改，就可以为这些人提供服务。”
——CTO, Mustang Bio
Cryopreserved Leukopak
让科学不因距离而受限
针对新鲜细胞材料的稳定性和活性有研究人员进行了对比实验。结果显示，新鲜的Leukopaks离体1-2天后，细胞稳定性会即会明显下降，细胞亚型分布也有明显变化。而冻存材料相比之下却可以保持稳定。
这个实验表明新鲜的Leukopaks产品的实际应用中从采集、处理、运输、收货、投入使用只有不到两天的时间，而且每次订购量必须准确预估，否则会有浪费或者材料不足的情况发生。
将同一个供体来源的Leukopaks分成四份，两份新鲜采集的Leukopaks模拟低温储存或运输情况，另两份分别在采集第0天和第1天冻存后复苏。
结果显示，细胞稳定性会随着时间的增加明显下降，冻存的两份材料在复苏后却能保持较高的活性并且采集离体后越快冷冻越能保证其活性和功能。
新鲜的Leukopaks在离体一段时间后，各细胞亚型分布产生明显变化，T细胞和NK细胞含量下降。且由于中性粒细胞的活化，在进行Ficoll分离时发现中性粒细胞含量明显增高。
原材料中粒细胞含量增加与冻融后细胞活性降低具有相关性
使用新鲜的Leukopaks必须要分秒必争，这必然让研究显得急促和焦虑。
Charles River Cell Solutions作为专业优质的细胞材料供应商不单单是为客户解决细胞材料问题，更是会不断探索冷冻保存技术，最大程度保持冻存Leukopaks产品活性和功能，使它变成一款不仅质量有保证，还对客户使用友好的产品。
上述的实验中明确了冻存的Leukopaks材料在复苏后能保持较高的活性。那么继续冻存更长时间，产品质量是否还能保持如初呢？
Charles River Cell Solutions的实验证实，冻存4个月后复苏的Leukopaks产品白细胞依然可以保持高纯度、高活性！实际上，曾有文献验证，冻存细胞产品在液氮条件下可以长期保存十几年之久依然维持较高质量。
Charles River Cell Solutions的科学家继续探索冻存时间对产品质量的影响，将处理和冻存等流程对细胞材料的影响降到最低。
实验将四位捐赠者处采集的Leukopaks分成三份，对比新鲜，冻存一个月后复苏和冻存四个月后复苏的Leukopaks中白细胞（WBC）的含量和活性。
结果显示，经过三种不同方式处理后的细胞材料中WBC的含量和活性并没有显著差异。尤其是细胞活性，均可稳定在90%左右。
进一步利用免疫磁珠技术从Leukopaks中分离T细胞时，均可以 获得高纯度 (average 97.6%, n=4 donors)且具有高活性(average 92.0% ，n=4 donors)的细胞。
在细胞治疗行业中，原材料中细胞的活性和功能性才是研究者切切实实关注的重点。Charles River Cell Solutions提供的Cryopreserved Leukopaks不仅可以满足客户对于品质的需求（Cell Viablity: ＞95%），还可以给实验更多的可能性。
我最欣赏Charles River Cell Solutions的不仅仅是他们不论何时都能够按时交付，还有他们始终保持质量至上的思维模式。此外，与他们交流时，我从未觉得自己是在被“ 销售拜访”，而是在讨论极具科学性的话题，让我觉得我们是共同迈入了令人兴奋的新领域。我和许多供应商都打过交道，Charles River Cell Solutions的奉献精神、灵活性和高质量无疑是卓尔不群的。
——诺华制药公司生产总监
CryoStor®冻存液，低温保存技术和运输经验，满足不同地区设施的客户需求，让科学不因距离而受限；
·FDA注册，AABB认可的收集中心
·采集方案经伦理审查委员会（IRB）批准
·符合FDA、EMA、PMDA等监管的捐献者知情同意书
·质量管理体系及检测体系经AABB及CLIA认证
·国外供体，不涉及生物安全法风险
所有捐赠者均会进行全套的传染病检测。HBV（乙型肝炎病毒）,HCV（丙型肝炎病毒），HIV（艾滋病病毒），HTLV（人类嗜T细胞病毒），WNV（西尼罗病毒），寄生虫克氏锥虫和梅毒检测。疫情期间，加测新冠病毒。
·庞大且多样的供体库，满足研究者复杂、特殊的筛选需求
·完善的捐献者管理体系，可计划性的召回供体
·可锁定供体，满足研究者对特定供体的持续性需求
采用与实验级别相同的采集和处理流程制，保证实验项目从前期研发到临床应用再到商业规模化的无缝衔接。
1.CAR-T细胞因子的多功能性和特异性
Xue, Q., Bettini, E., Paczkowski, P., Ng, C., Kaiser, A., & McConnell, T. et al. Singlecell multiplexed cytokine profiling of CD19 CAR-T cells reveals a diverse landscape of polyfunctional antigen-specific response . Journal for Immunotherapy of Cancer,5(1). 2017.
诺华（Novartis）研究者使用Charles River Cell Solutions外周血单核细胞（PBMC）构建了CD19 靶向的T细胞。研究者用这些细胞来研究CD19 CAR-T细胞因子应答特征与患者反应和预后之间的关系。
2.寻求增强T细胞活性的新癌症免疫疗法
Oberst MD, et al. Potent Immune Modulation by MEDI6383, an Engineered Human OX40 Ligand IgG4P Fc Fusion Protein. Molecular Cancer Therapeutics .17(5); 1024‒38. May 2018.
由MedImmune /阿斯利康（AstraZeneca）发表的一项独立研究指出，使用Charles River Cell Solutions的leukopaks产品可助力开发治疗癌症的新方法。此项新技术基于一种名为MEDI6383的工程蛋白，初步研究表明其抗癌效果很明显，一期临床试验指日可待。
3.Charles River Cell Solutions免疫细胞Ace细胞毒性试验用于筛选治疗性抗体
Hsieh Y, et al. Chara cterization of Fc γRIIIA eff ector cells used in in vitro ADCC bioassay: Comparison of primary NK cells with engineered NK-92 and Jurkat T-cells.Journal of Immunological Methods. 441;56-66. Feb. 2017.
辉瑞公司最近发表的一项独立研究表明，在细胞毒性测试中可使用Charles River Cell Solutions的自然杀伤（NK）免疫细胞来评估药物的适用性。
