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QLeukopaks中各类细胞占比？
ACharles River Leukopaks中80%都是PBMCs，巨噬细胞（Monocytes (CD14) 需要通过磁珠分选法从PBMCs中进行分选）——(占Leukopaks总量大概20%), Leukopaks里面包括PBMCs和其他，PBMCs由淋巴细胞和单核细胞组成，淋巴细胞包括T淋巴细胞，B淋巴细胞和NK细胞。
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QPBMCs复苏之后是直接使用还是建议培养过夜后使用？
A建议复苏之后基础培养基+10%血清培养箱放置6-12个小时后做后续处理。
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Q推荐冻存PBMCs复苏后多久开始使用？
A可根据不同实验目的进行选择。体内建模，MLR实验一般选择复苏后直接使用；细胞增殖、ADCC等实验选择复苏后37℃ CO2 培养箱培养6-8h过夜后开始实验。
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Q从冻存的PBMCs提取CD3﹢T细胞，大概能收集到多少？
A根据COA 中的流式图所示，CD3所占比就是理论上可以提取的CD3细胞数量，但是最终比例还是取决于供体，供体差异性的影响T细胞的比例，范围在30%-70%，平均值在50%，提取率跟操作员操作水平有关，误差在10%-30%左右。
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QPBMCs是否可以进行传代？
A人体PBMCs是不同细胞类型的混合物，包括T细胞、B细胞、单核细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)，没有物质刺激它们都不会生长（单核细胞永远不会增殖)。根据客户使用的刺激因子，客户的PBMCs培养将以T细胞或B细胞为主，迅速将细胞混合物转变为单一细胞类型。了解了这些后，可以培养您感兴趣的细胞亚型，但体外增殖的细胞在培养后已与PBMCs不同。正常情况下，这些细胞已经分化并处于最终的细胞亚型中。
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QCD4ASTC和CD8ASTC的区别是什么？
ACD8 ASTC，抗原与MHC类I结合；而CD4 ASTC，抗原与MHC类II结合。
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QASTC是否有特定供体来源HLA的要求？
A目前未统计其他HLA分型，现有ASTC的供体一般是HLA02。
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Q我需要购买什么与ASTC一起进行功能测定？
A用来激活T细胞的肽和APC (B-LCL)。所有这些产品都是由Charles River提供的。
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QB淋巴母细胞(B-LCL)和T细胞是否来自同一个供体以产生抗原特异性T细胞？
A是的。
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QASTC和APC是否需要具有相同的HLA分型？
A是的，自体APC是最好的；但如果首选异体APC，那APC和ASTC需要HLA 匹配。
